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NIBSC 154脊髓灰質(zhì)炎病毒2型MAPREC分析

產(chǎn)品時(shí)間:2022-03-04

簡(jiǎn)要描述:

NIBSC 97/756 脊髓灰質(zhì)炎病毒2型MAPREC分析(標(biāo)準(zhǔn)品)旨在用作對(duì)照以確定個(gè)體測(cè)定在 MAPREC 測(cè)定中是否有效。每個(gè)檢測(cè)還應(yīng)包括一個(gè)高病毒對(duì)照,編碼為 98/596,以及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) 97/758


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世界衛(wèi)生組織參考試劑

第一個(gè)國(guó)際參考試劑(低病毒參考)

2 型脊髓灰質(zhì)炎病毒的 MAPREC 分析

NIBSC 97/756


酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎細(xì)胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細(xì)胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))
五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。


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